腫瘤細胞Transwell

簡要描述：腫瘤細胞Transwell：Transwell 應該是一種實驗技術，這項技術的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber, Transwell insert），其外形為一個可放置在孔板里的小杯子，

更新時間：2022-12-23
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將Transwell小室放入培養板中，小室內稱上室，培養板內稱下室，上室內盛裝上層培養液，下室內盛裝下層培養液，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞，從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。應用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進行共培養、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。當然不同細胞其體積不同，具體選擇時要考慮到細胞大小。這里主要談幾種大家常用的實驗:
(1) 共培養體系:
小于3.0um孔徑條件下，細胞不會遷徙通過，因此，若研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜，則應選擇3.0μm以下孔徑。常用0.4、3.0um。我們實驗室用的是0.4μm。將細胞A種于上室，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的影響。
(2)趨化性實驗:
可用5.0、8.0、12.0μm膜，上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室，計數進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。
①細胞B對細胞A的趨化作用:將細胞A種于上室，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的趨化作用。
②趨化因子對細胞的趨化作用:將細胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。

(3)腫瘤細胞遷移實驗:
常用8.0、12.0μm膜，上室種腫瘤細胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑，計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。

(4)腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0um 膜，原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。transwell侵襲實驗，其實原理簡單地說就是用一層膜將高營養的培養液和低營養的培養液隔開，細胞放在低營養的培養液里，為了找吃的，細胞會往高營養的培養液里面跑，但是有膜擋著，所以要穿過膜才行。我們在膜上涂上一層基質膠，模仿細胞外基質，于是細胞要把基質消化了才可以從低營養的培養液跑到高營養的培養液里面,后我們檢測高營養的培養液.里細胞量就可以知道細胞的侵襲能力了。

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